Molecular Prevalence On The Distribution Of European Honeybee Subspecies And Honey Bee Mites Related Virus Diseasesat Chiang Mai Province, Thailand

Abstract

Thailand commercial beekeeping started in 1979. Thailand has three Apis mellifera subspecies,ThaiA1 (A. m. ligustica), ThaiA2 (A. m. carnica) and ThaiB (A. m. syriaca). Parasitic bee mites (Tropilaelaps and Varroa) and some virus infections affect honey bee's health. Diseases are one of the main economic loss factors of commercial beekeeping in Thailand. In this study A. mellifera subspecies were examined using PCR-RFLP in order to determine virus infection on Tropilaelaps mites, Varroa mites and honey bee subspecies using RT-PCR in five different districts in Chiang Mai and one district in Nan province. The results of A. mellifera subspecies showed percentage of the haplotype group distribution were ThaiA1 (41.67%), ThaiA2 (50.00%) and Thai B (8.33%). The three bee subspecies in Chiang Mai distributed were ThaiA1 for 52%, ThaiA2 for 38% and ThaiB for 10%, Nan province found ThaiA1 for 60% and ThaiA2 for 40%. The result of 7 virus detections on honey bees subspecies and mites detected six virus strains (ABPV, DWV, VDV-1, CBPV, KBV and SBV).Infected on honey bees, three virus strains (ABPV, DWV, and VDV-1) and on Varroa mites four virus strains (ABPV, CBPV, DWV and VDV-1) infected on Tropilaelaps mites. On bees and two mite there were three virus strains (ABPV, DWV and VDV-1).Therefore, the phylogenetic relationship of each virus strains with NJ tree may be correctly identified with viral strains from sequences database. However, these sequences of ABPV, DWV and VDV-1 showed variation in each strain sequences. Especially, the results of NJ tree of virus strain combination DWV/VDV-1 and DWV/ABPV may show some mistakes in virus strain clustering. Moreover, the correlation of virus infection and their mite hosts was indicate significant with both Tropilaelaps and Varroa. Tropilaelaps mites were showed 99% (p>0.01) correlation with DWV, ABPV, CBPV and VDV-1. Varroa mites were not correlated with virus infection.ThaiA (ThaiA1 and ThaiA2) subspecies were 95% (p>0.05) correlation with ABPV, CBPV and VDV-1.Thai B subspecies were 95% (p>0.05) correlated with ABPV.Three honey bee subspecies in this research were 95% (p>0.05) correlated with ABPV. ABPV was a common virus in honey bee subspecies and their mites.

การเลี้ยงผึ้งทางการค้าของประเทศไทยเริ่มมาตั้งแต่ปี ค.ศ. 1979 การเลี้ยงผึ้งในประเทศไทยนิยมเลี้ยงผึ้งพันธุ์ (Apis mellifera) ซึ่งมีการกระจายของผึ้งพันธุ์ 3 ชนิดย่อย ได้แก่ ThaiA1 (A. m. ligustica) ThaiA2 (A. m. carnica) และThaiB (A. m. syriaca) ไรศัตรูผึ้งกลุ่มไรทรอปิลีแลปส์กลุ่มไรวารัวร์และการติดเชื้อโรคไวรัสมีความสำคัญมากต่อสุขภาพของผึ้งพันธุ์ที่นำมาเลี้ยงการติดเชื้อโรคเป็นปัจจัยสำคัญที่ทำให้เกิดการสูญเสียต่อธุรกิจการเลี้ยงผึ้งในประเทศไทยการศึกษานี้เป็นการตรวจหาเชื้อไวรัสที่มีในกลุ่มไรทรอปิลีแลปส์ไรวารัวร์และผึ้งพันธุ์แต่ละชนิดย่อยโดยวิธีอาร์ที-พีซีอาร์ (RT-PCR) จาก 5 พื้นที่ของจังหวัดเชียงใหม่ และ 1 พื้นที่ของจังหวัดน่านการศึกษาการกระจายช นิดย่อยข องผึ้งพันธุ์แสดงให้เห็นค่าร้อยละของการกระจายทั้ง 3 สายพันธุ์ย่อยคือ ThaiA1 ร้อยละ 41.67 ThaiA2 ร้อยละ 50 และThaiB ร้อยละ 8.33 ซึ่งการกระจายของผึ้งพันธุ์ทั้ง 3 สาย พันธุ์ย่อยในจังหวัดเชียงใหม่คือ ThaiA1 ร้อยละ 52 ThaiA2 ร้อยละ 38 และ ThaiB ร้อยละ 10 และจังหวัดน่านพบการกระจายของ ThaiA1 ร้อยละ 60 และ ThaiA2 ร้อยละ 40 ผลการตรวจสอบไวรัสผึ้ง 7 สายพันธุ์ในชนิดย่อยของผึ้งพันธุ์ไรทรอปิลิแลป และวาร์รัวพบไวรัสผึ้ง 6 สายพันธุ์ (ABPV, DWV, VDV-1, CBPV, KBV และSBV) ที่เข้าทำลายผึ้งพันธุ์ไวรัส 3 สายพันธุ์ (ABPV, DWV และ VDV-1) เข้าทำลายไรวาร์รัวและไวรัส 4 สายพันธุ์ (ABPV, CBPV, DWV และ VDV-1) เข้าทำลายไรทรอปิลิแลปมีไวรัส 3 สายพันธุ์ (ABPV, DWV และ VDV-1) ที่เข้าทำลายผึ้งพันธุ์และไรทั้งสองกลุ่มในการเปรียบเทียบจากแผนภาพความสัมพันธ์ของไวรัสแต่ละสายพันธุ์ด้วยแผนภาพต้นไม้แบบ NJ จะระบุสายพันธุ์ไวรัสจากลำดับนิวคลีโอไทด์ในฐานข้อมูลอย่างไรก็ตาม ลำดับนิวคลีโอไทด์ของ ABPV, DWV และ VDV-1 พบความผันแปรในไวรัสแต่ละสายพันธุ์โดยเฉพาะผลการวิเคราะห์แผนภาพ NJ แสดงความสัมพันธ์ของสายพันธุ์ไวรัสที่พบร่วมกันได้แก่ DWV/VDV-1 และ DWV/ABPV จะพบความผิดพลาดที่อาจเกิดการจัดกลุ่มของสายพันธุ์ไวรัสที่มีการปะปนกัน ยิ่งไปกว่านั้นการติดเชื้อไวรัสกับไรศัตรูผึ้งที่เป็นพาหะมีข้อบ่งชี้ที่เป็นนัยสำคัญของไรศัตรูผึ้งทั้ง 2 สายพันธุ์ (ไรทรอปิลิแลปและวาร์รัว) พบว่าไรทรอปิลิแลปมีความสัมพันธ์ ร้อยละ 99 (p>0.01) กับไวรัสสายพันธุ์ DWV, ABPV, CBPV และ VDV-1 ไรวาร์รัว ไม่พบความสัมพันธ์ทางสถิติกับการติดเชื้อไวรัสโดยที่ผึ้งสายพันธุ์ ThaiA (ทั้ง ThaiA1 และ ThaiA2) มีความสัมพันธ์ ร้อยละ 95 (p>0.05) กับไวรัสสายพันธุ์ ABPV, CBPV และ VDV-1 ขณะที่ผึ้งสายพันธุ์ ThaiB สัมพันธ์ร้อยละ 95 (p>0.05) กับไวรัส สายพันธุ์ ABPV ผึ้งทั้ง 3 สายพันธุ์ ต่างมีความสัมพันธ์ ร้อยละ 95 (p>0.05) กับไวรัสสายพันธุ์ ABPV โดยทั่วไป การติดเชื้อไวรัส สายพันธุ์ ABPV มักจะพบได้ทั้งในผึ้งและไรศัตรูผึ้ง